André Passaglia Schuch
From Laboratório de Reparo de DNA
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| - | A radiação solar é um dos principais fatores para a existência da vida na Terra. Mas, apesar de seu efeito benéfico e indispensável, a ação biológica de seus menores comprimentos de onda é danosa para os organismos, sobretudo devido à indução de danos no DNA. | + | Devido a sua localização geográfica, altas doses de radiação ultravioleta (UV) incidem no território brasileiro, onde a população tem como costume se expor prolongadamente aos raios solares. Consequentemente, o uso de produtos contendo filtros solares tornou-se a principal estratégia de proteção adquirida por grande parte da população. A avaliação atual do Fator de Proteção Solar (FPS) de uma substância é aqui questionada devido a verificação de uma eficiente indução de lesões de DNA pela radiação UVA, na qual não é considerada em testes de FPS por não induzir eritema. Desta forma, com o uso da tecnologia Dosímetro de DNA, pretendemos avaliar a eficiência de proteção biológica de substâncias através da determinação do fator de proteção solar ao DNA (FPS-DNA).Os valores do FPS-DNA serão obtidos através da quantificação de lesões de DNA com o uso de enzimas de reparo de DNA e anticorpos específicos, após exposições às radiações UVB, UVA e solar. Esses serão correlacionados com a indução de lesões de DNA e de apoptose em linhagens de fibroblastos humanos (proficientes e deficientes em reparo de DNA). Também, pretende-se construir uma nova linhagem de fibroblasto humano deficiente nas vias de reparo por excisão de nucleotídeos (mutada no gene XPA) e no reparo por excisão de bases, através do silenciamento do gene OGG1 com o uso de lentivírus recombinante e transdução do shRNA específico para esse gene. Com essas células, será possível avaliar o real impacto biológico das lesões oxidativas formadas pela luz UVA. Portanto, a aplicação do Dosímetro de DNA fornecerá uma análise a nível molecular da qualidade de proteção de uma determinada substância. |
| - | Com a descoberta da redução do ozônio estratosférico global, e devido ao possível aumento da intensidade dos raios ultravioleta (UV) que atingem a superfície terrestre, a radiação UV solar torna-se um agente genotóxico ambiental de interesse social. A importância associada a este assunto merece destaque no território brasileiro, que abrange regiões de clima tropical e subtropical, onde existe uma intensa exposição da população à luz solar e uma alta incidência de câncer de pele no país. | + | |
| - | Desta forma, a proposta do presente trabalho consiste no desenvolvimento de um sistema capaz de avaliar os efeitos biológicos da radiação UV solar a partir dos danos provocados na molécula de DNA. Para determinar a média dos diferentes tipos de lesões de DNA formadas após as irradiações, são utilizadas enzimas de reparo de DNA (glicosilase e endonucleases) que reconhecem e clivam o sítio contendo uma lesão específica. Complementando estas análises, são realizados ensaios de freqüências de mutação e da taxa de inativação biológica de DNA através do uso da linhagem de E. coli MBL50 e do vetor pCMUT, que transporta o gene supF como alvo mutagênico. | + | |
| - | Os resultados já obtidos durante o desenvolvimento do Projeto de Mestrado mostram claramente que há uma produção significante de dimeros de pirimidina (CPDs) após a exposição do Dosímetro de DNA em doses crescentes de radiação UVC, UVB, UVA e na luz solar, assim como, um aumento na indução da mutagênese e na taxa de inativação biológica de DNA. | + | |
| - | A diferença entre a indução de danos oxidativos e CPDs em DNA plasmidial exposto à luz solar é pequena, mas CPDs aparecem como sendo o tipo de lesão mais abundante, verificando uma proporção média de indução de lesões de 3 CPDs para 1 6-4 PPs (pirimidina pirimidona 6-4 fotoprodutos). | + | |
| - | Portanto, com o uso deste dosímetro biológico in situ serão desenvolvidas amplas análises dos níveis de produção destas fotolesões de DNA, de seus resultantes efeitos biológicos e, principalmente, dos tipos de mutações induzidas por estas lesões diretamente no ambiente. | + | |
| ==Publicações== | ==Publicações== | ||
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| |}SCHUCH, André Passaglia; GUARNIERI, Ricardo A; ROSA, Marcelo Barcelos; PINHEIRO, Damaris K; MUNAKATA, Nobuo; SCHUCH, Nelson Jorge. Comparisons of Biologically Effective Doses of Solar UV-Radiation Determined with Spore Dosimetry and Spectral Photometry in 2000 – 2003 at Southern Brazil. Advances in Space Research, vol. 37, 1784-1788, 2006. | |}SCHUCH, André Passaglia; GUARNIERI, Ricardo A; ROSA, Marcelo Barcelos; PINHEIRO, Damaris K; MUNAKATA, Nobuo; SCHUCH, Nelson Jorge. Comparisons of Biologically Effective Doses of Solar UV-Radiation Determined with Spore Dosimetry and Spectral Photometry in 2000 – 2003 at Southern Brazil. Advances in Space Research, vol. 37, 1784-1788, 2006. | ||
Revisão de 16:40, 13 Outubro 2011
Possui graduação em Ciências Biológicas pela Universidade Federal de Santa Maria (2005), onde foi bolsista do Programa Especial de Treinamento - PET-BIO/UFSM e estagiário voluntário do Centro Regional Sul de Pesquisas Espaciais. Atualmente, é aluno de Mestrado do curso Interunidades em Biotecnologia pela Universidade de São Paulo. Tem experiência na área de Microbiologia, com ênfase em Biologia Molecular, atuando principalmente nos seguintes temas: reparo de DNA, mutagênese ambiental, fotobiologia e biotecnologia.
Resumo do Projeto
Devido a sua localização geográfica, altas doses de radiação ultravioleta (UV) incidem no território brasileiro, onde a população tem como costume se expor prolongadamente aos raios solares. Consequentemente, o uso de produtos contendo filtros solares tornou-se a principal estratégia de proteção adquirida por grande parte da população. A avaliação atual do Fator de Proteção Solar (FPS) de uma substância é aqui questionada devido a verificação de uma eficiente indução de lesões de DNA pela radiação UVA, na qual não é considerada em testes de FPS por não induzir eritema. Desta forma, com o uso da tecnologia Dosímetro de DNA, pretendemos avaliar a eficiência de proteção biológica de substâncias através da determinação do fator de proteção solar ao DNA (FPS-DNA).Os valores do FPS-DNA serão obtidos através da quantificação de lesões de DNA com o uso de enzimas de reparo de DNA e anticorpos específicos, após exposições às radiações UVB, UVA e solar. Esses serão correlacionados com a indução de lesões de DNA e de apoptose em linhagens de fibroblastos humanos (proficientes e deficientes em reparo de DNA). Também, pretende-se construir uma nova linhagem de fibroblasto humano deficiente nas vias de reparo por excisão de nucleotídeos (mutada no gene XPA) e no reparo por excisão de bases, através do silenciamento do gene OGG1 com o uso de lentivírus recombinante e transdução do shRNA específico para esse gene. Com essas células, será possível avaliar o real impacto biológico das lesões oxidativas formadas pela luz UVA. Portanto, a aplicação do Dosímetro de DNA fornecerá uma análise a nível molecular da qualidade de proteção de uma determinada substância.
Publicações
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