Regina Célia Pereira Marques

From Laboratório de Reparo de DNA


Sou graduada em Ciências Biológicas pela Universidade do Estado do Rio Grande do Norte e mestre em Genética e Biologia Molecular pela Universidade Federal do Rio Grande do Norte. Participei do sequenciamento do Genoma do Schistosoma mansoni e Aedes aegypti. Atualmente sou doutoranda pelo departamento de microbiologia da Universidade de São Paulo.


Resumo do Projeto

O projeto visa identificar genes envolvidos em reparo de DNA na proteobactéria, subdivisão alfa, Caulobacter crescentus através de uma abordagem genômica funcional. Para isso selecionamos mutantes dessa bactéria com sensibilidade a agentes genotóxicos (metil-metano-sulfonato e UV). Esses mutantes foram obtidos a partir de uma biblioteca de aproximadamente 5000 clones, mutada por inserção aleatória do transposon Tn5 (que inclui o gene kan , que dá resistência a kanamicina), e a abordagem foi realizada por testes em larga escala (96 clones testados a cada vez), e posterior confirmação do fenótipo (sensível ao agente genotóxico) individual. Genes contendo o inserto, Tn5, foram selecionados a partir do clone mutado através de clivagem do genoma bacteriano com enzima de restrição, subclonagem em plasmídeo e seleção com kanamicina. Sequenciamento de DNA a partir do DNA do transposon permitiu identificar as regiões flanqueadoras do tn5 e, portanto, a identidade do gene mutado. Pretendemos ainda identificar, através de análise bioinformática, genes novos que potencialmente estejam relacionadas a reparo de DNA em Caulobacter, muito embora não estejam descritos para Escherichia coli. Alguns candidatos já foram encontrados, entre eles uma ligase dependente de ATP, ligB, e uma nova DNA polimerase, dnaE2(Galhardo et al., 2005) e pretendemos, através de genética reversa- inativação do gene de interesse, identificar seu fenótipo quanto a sensibilidade a agente genotóxico e mutagencidade. Esta é, de nosso conhecimento, a primeira abordagem genômica para identificação de genes de reparo de DNA em bactérias, e a nossa expectativa é de que consigamos demonstrar a função de vários ortólogos já identificados em E.coli, além de identificar genes cuja função em reparo de DNA ainda não foi descrita.

Publicações

Marinalva Martins-Pinheiro, Regina CP Marques, and Carlos FM Menck. Genome analysis of DNA repair genes in the alpha proteobacterium Caulobacter crescentus. BMC Microbiol. 2007; 7: 17.

Verjovski-Almeida S ; DeMarco R ; Martins EA ; Guimaraes PE ; Kitajima JP ; Leite RA ; MARQUES, R. C. P. ; Soares MB ; Menck CF ; Dias-Neto E . Transcriptome analysis of the acoelomate human parasite Schistosoma mansoni.. Nature Genetics, Londres, v. 35, n. 02, p. 148-157, 2003.

MARQUES, R. C. P. ; Batistuzzo -Medeiros S R ; Dias CS ; Barbosa-Filho JM ; Agnez-Lima LF . Evaluation of the mutagenic potential of yangambin and of the hydroalcoholic extract of Ocotea duckei by the Ames test.. Mutation Research/Genetic Toxicology and Environmental Mutagenesis, v. 536, p. 117-120, 2003.

Capítulos de livros publicados

1. Menck CF ; Agnez-Lima LF ; Batistuzzo -Medeiros S R ; MARQUES, R. C. P. ;PINHEIRO, M. M. . Processos de Reparo de DNA:garantindo a estabilidade do material genético. In: Lúcia Regina Ribeiro; Daisy Maria Fávero Salvadori; Edmundo Kanan Marques. (Org.). Mutagênese Ambiental. 1a ed. Canoas/RS: Editora da ULBRA, 2003, v. 1, p. 21-347.

Ferramentas pessoais
Outras línguas