Aparelho de análise de fluxo extracelular (Seahorse XFe96)

 

Aparelho de análise de fluxo extracelular (Seahorse XFe96)

Projeto EMU FAPESP n° 2018/08479-7

 

O aparelho Seahorse XFe96 tem a capacidade de avaliar, em tempo real, diversos parâmetros metabólicos simultaneamente em até 96 amostras de células, tecidos ou outros organismos em cultura. O instrumento mede o pH e as concentrações extracelulares de O2, glicose e lactato para fornecer estimativas do uso da glicose pelas células. O analisador XFe96 possui um avanço significativo comparado às outras metodologias existentes para quantificar e avaliar vias metabólicas celulares.

Aplicações:

  • Mede a taxa de consumo de oxigênio (OCR – oxygen consumption rate) e a taxa de acidificação extracelular (ECAR – extracelular acidifcation rate), indicativos de respiração mitocondrial e glicólise, respectivamente.
  • Avalia a flexibilidade, dependência e capacidade de combustíveis mitocondriais.
  • Determina o fenótipo metabólico da população celular em estudo.

 

Vantagens:

  • Avaliações simultâneas e em tempo real da glicólise e respiração mitocondrial.
  • Quantificações não invasivas sem a necessidade do uso de corantes ou marcadores adicionais.
  • Não necessita de substratos radioativos.
  • Quantificação de consumo de oxigênio com rendimento superior ao encontrado com uso de eletrodos polarográficos.
  • Versatilidade quanto aos tipos de amostras a serem analisadas: linhagens celulares, células primárias, mitocôndrias isoladas e outros organismos (por exemplo, C. elegans).
  • Possibilidade de aferições múltiplas para avaliação cinética funcional.
  • Sem a necessidade de limpeza pré e pós análise.
  • Possibilidade do uso de até 4 compostos (drogas e/ou substratos) que podem ser adicionados automaticamente a cada poço.

 

Materiais necessários para a realização do ensaio:

  • Placas, cartuchos (cartridges), calibrador Seahorse, meios de cultura Seahorse, reagentes Seahorse.

 

Exemplos de análises obtidas pelo aparelho Seahorse XFe96.

Responsável:

Prof. Dr. Niels Olsen Saraiva Câmara (niels@icb.usp.br)

 

Equipe Técnica:

Meire Yoshi Hiyane (miy@icb.usp.br)

 

Agendamento (em breve)

 

Email para contato (temporário): seahorse.usp@gmail.com

 

Valores praticados pelo serviço (em breve)

 

O aparelho está localizado no prédio IV do Instituto de Ciências Biomédicas – Av. Prof. Lineu Prestes, 1730, Cidade Universitária, Butantã, São Paulo, São Paulo – CEP: 05508-900.

 

Telefone para contato: (11) 3091-7388

 

Links de interesse:

https://www.agilent.com/en/promotions/seahorse-xf-technology

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4864360/