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Biologia Molecular e Desenvolvimento
de Vacinas em Plasmodium
As atividades de pesquisa em malária em nosso laboratório
concentram-se principalmente em duas áreas: biologia molecular e
desenvolvimento de vacinas.
Na área de Biologia Molecular, nós construímos
uma biblioteca genômica de P. vivax, o parasita da malária
com maior prevalência na América Latina e responsável
por 80 milhões de casos anualmente no mundo, em cromossomos artificiais
de levedura (YACs - "Yeast Artificial Chromosomes") e com material de parasitas
obtidos de um único paciente infectado na Amazônia brasileira.
A geração de uma fonte ilimitada de material do parasita
foi de grande relevância, já que não é possível
manter continuamente P. vivax em culturas in vitro. A disponibilidade desta
biblioteca tem nos permitido aplicar técnicas de comparação
de genoma para responder diferentes aspectos da patologia associada a infecções
por P. vivax, tais como variação antigênica, resistência
drogas e identificação de marcadores de microssatélites.
Estamos agora prosseguindo com esses estudos, dando particular ênfase
aos genes associados à virulência de P.vivax (vir) para analisar
seu papel em infecções naturais e experimentais. Sendo assim,
estamos analisando a expressão dos genes vir em parasitas obtidos
diretamente de pacientes. Além disso, utilizando técnicas
de transfecção, estamos tentando expressar esses genes em
P. falciparum para determinar sua importância na virulência.
Outros estudos em Biologia Molecular em Plasmodium têm sido ou estão
sendo realizados em nosso laboratório, incluindo um sobre a família
multigênica dos genes var de P. falciparum na Amazônia brasileira,
e tentativas de estabelecer um sistema induzível baseado em um transativador
de transcrição em Plasmodium.
Na área de desenvolvimento de vacinas, temos concentrado nosso
trabalho na proteína de superfície do merozoíto 1
de P. vivax (PvMSP1), e em particular na região C-terminal da molécula,
PvPMSP119. A PvPMSP119 foi escolhida, pois estudos sobre imunidade naturalmente
adquirida de pacientes com infecção por P. vivax da Amazônia
brasileira têm revelado que esta é a porção
mais imunogênica da proteína e a única capaz de provocar
um aumento no nível de anticorpos após novas infecções.
Portanto, geramos um plasmídeo recombinante que codifica a PvMSP119
e o qual é antigênico em camundongos. Além disso, geramos
também uma linhagem de Toxoplasma gondii transgênica expressando
a PvMSP119 (dados não publicados). Ambas construções
estão no momento sendo testadas em ensaios pré-clínicos
em macacos e está sendo gerado um P. falciparum transgênico
expressando a PvMSP119 para determinar a importância de anticorpos
na resposta imunogênica induzida nestes ensaios preclinicos.
Research Interest Molecular Biology and Vaccine Development in Malaria.
Research key words Malaria, Plasmodium, molecular biology, virulent
genes, vaccines. |
