Eletroeluição de DNA
1. Correr o DNA digerido em gel 1% (poco grande).
2. Colocar sobre o gel EtBr (0,5 ug/ml) por alguns minutos.
3. Recortar a banda no UV.
4. Eletroeluir em 0,2x TAE a 100V/1h (pelo menos)(400 a 500 ul de 0,2x
TAE dentro do saco).
5. Tirar o gel do saco. Recolocar o saco sem o gel de volta na cuba, e
reverter a corrente por 30 seg.
6. Extrair com fenol e entao com fenol-CHCl3 (1:1).
7. Precipitar com glicogenio (1 ul de 20mg/ml) + 0,1 vol de NaOAc 3M +
2 vol de etanol.
8. Precipitar overnight a -20oC.
9. Centrifugar a 14.000 rpm por 20 min a 4oC.
10. Lavar com EtOH 70% (a 14.000 rpm/20 min) e secar.
11. Ressuspender em 20-25 ul de TE.
12. Correr 1 ul para ver quanto tem.